Как срочно сделать пцр тест на коронавирус
Добавил пользователь Евгений Кузнецов Обновлено: 05.10.2024
Есть всего 2 типа тестов на коронавирус. Первый ищет непосредственно РНК-вируса. Это тест ПЦР (ПЛР) . Если ее нашли — данный вирус есть, Вы заражены, заразны для окружающих, даже если у Вас нет симптомов. Второй ищет антитела, которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение вируса. Это ИФА-тесты или ELISA.
ПЦР-тесты
ПЦР-исследование подходят для выявления вируса на ранних стадиях, с первого дня заражения. И для того, чтобы понять является ли человек носителем или нет. Тест ПЦР выполняется в специальной лаборатории и занимает от 6 часов до 2-х дней. На данный момент он является золотым стандартом для диагностики ковида во всем мире.
Какой материал используется?
Несмотря на то, что некоторые лаборатории используют для анализа только мазок из ротоглотки, заграничные исследования показали, что намного лучше использовать мазки из ротоглотки и носа.
Какова точность анализа?
Точность анализа зависит от правильности забора материала, условий хранения и транспортировки, качества реактивов и компетентности специалистов (человеческого фактора).
За период работы с коронавирусом (с марта 2020) мы провели испытания более 10 наборов реагентов как отечественных, так и заграничных производителей. На данный момент мы используем наборы производства DIAGEN. Они позволяют выявлять сразу две мишени в геноме вируса и имеют самую высокую чувствительность.
Чтобы свести к минимуму человеческий фактор мы используем автоматическую систему для выделения РНК. Она позволяет ускорить процесс обработки биоматериала и проводить часть исследование без участия лаборантов. Данный подход позволил нам достичь 99,5% чувствительности и 100% специфичности тестов.
Когда сдавать тест ПЦР?
У пациентов с симптомами
На данный момент известно (Wölfel, R., et al.) о хорошей выявляемости вируса методом ПЦР при анализе мазка из верхних дыхательных путях в течение первой недели после появления симптомов. Наибольшая концентрация вируса наблюдается в 4-7 день (7,11*10^8 копий РНК) (Yang Pan., et al.). У пациентов с тяжелым течением заболевания наблюдается значительно большая концентрация вируса (>60 раз), в сравнении с пациентами с легкой формой. Пациенты с легкой формой быстрее избавляются от вируса, и на десятый день после начала симптомов часто показывают отрицательный результат ПЦР исследования, в отличие от пациентов с тяжелым течением, которые на десятый день заболевания остаются ПЦР-положительными (Yang Liu et al.).
У пациентов без симптомов
Средний инкубационный период, то есть время от потенциального заражения до появления симптомов, составляет 5-6 дней, но в некоторых случаях может быть от 2 до 14 дней и более (Backer JA). В этот период человек может быть носителем вируса и передавать вирус другим людям. Пик заразности как раз приходится на период до начала симптомов.
У людей, у которых коронавирусная инфекция протекает без симптомов, методом ПЦР наиболее эффективно способен выявить РНК вируса с 2 по 14 день инфекции в мазках из ротоглотки или носовых ходов (Yongjian Wu et al.).
На поздних этапах
Известно о снижении концентрации вируса в верхних дыхательных путях в период после 14 дней после заражения (Lippi, G. 2020). Что связано с изменением концентрации вируса в разные периоды протекания заболевания. Это усложняет диагностику в этот период, но в некоторых случаях удается выявить вирус методом ПЦР вплоть до 30 дня после заражения.
ИФА-тесты
Определяет антитела, которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение вируса. Тут есть нюансы – разные антитела вырабатываются в разное время: IgM достигают своей максимальной концентрации через 5-7 дней после появления симптомов; IgG еще позже. Поэтому, используя разные тесты в разное время – получаем разные результаты.
Именно этот тест имеет смысл сдавать, если Вы хотите узнать перенесли ли Вы уже инфекцию и есть ли у Вас иммунитет к вирусу. На данный момент считается, что данный тест будет положительным в течение всей жизни после контакта с вирусом.
Источник: Interpreting Diagnostic Tests for SARS-CoV-2
Быстрые тесты
Существует еще один вид тестов, так называемые быстрые или экспресс-тесты (в нашей лаборатории данный вид теста мы не проводим). Это ELISA, объединенная с хроматографией – иммунохроматография. Работает, как тест на беременность – все необходимые реагенты уже нанесены на специальную тест-пластину. Результат учитывается по количеству проявившихся цветных полосок. Часто для таких тестов лаборатория не нужна, их можно делать даже в домашних условиях. Но лучше, чтобы тесты проводил медицинский персонал. Данные тесты делаются по крови с пальца, и занимают всего 15 минут. В качестве платы за быстроту, у этих тестов часто хромает чувствительность. У некоторых производителей она составляет всего 60-70%. Медицинские организации рекомендует использовать такие тесты только в чрезвычайных случаях, и любые их результаты повторно проверять методом ПЦР и ИФА.
Как не потеряться в тестах?
Если Вам предлагают купить / сделать тест, ориентируйтесь на материал: кровь или мазок слизистых? Если для анализа берут кровь из вены – значит это ИФА тест, кровь из пальца – быстрый тест, если мазок из ротовой полости – ПЦР.
Сравнительная характеристика тест-систем
| ИФА | Быстрый тест | ПЛР | |
|---|---|---|---|
| Материал | кровь | кровь | мазок из ротоглотки/носа |
| Чувствительность | 88,7% | 75% | 50-90% |
| Специфичность | 90,6% | 81% | 100% |
| Производитель | США | Китай | Швейцария |
| Сертификат CE-IVD | 08.03.2020 | неизвестно | 13.03.2020 |
Интерпретация результатов (может отличатся в разных лабораториях)
| ИФА / ПЛР | Результат | Интерпретация результата | Статус |
|---|---|---|---|
| ИФА (иммуноферментный анализ) | IgM | У вас нет антител к вирусу, что говорит о том, что Вам необходимо соблюдать меры предосторожности для предотвращения возможного заболевания. | Не сталкивался с вирусом |
| IgM > 1.1 позитивний и IgG | Вы находитесь в стадии заболевания. Даже если Вы не чувствуете недомогание, Вы носитель вируса. Это опасно для Вас и окружающих. Пожалуйста, находитесь в режиме самоизоляции в течение 14 дней, не контактируйте с людьми для предотвращения их заражения. Если у Вас плохое самочувствие, немедленно вызывайте врача. | В стадии заболевания | |
| IgM > 1.1 позитивний и IgG >= 1.1 позитивний | У Вас имеются антитела к вирусу. Наличие IgM говорит о том, что вирус еще может находиться в Вашем организме и Вы можете переносить инфекцию в скрытой (бессимптомной) форме. Данное заболевание еще не до конца изучено, поэтому в качестве профилактической меры просим Вас сократить контакты с близкими людьми в течение 7 дней. Через неделю сдайте анализ ПЦР на вирус. | Сомнительный результат | |
| IgM = 1.1 | У Вас имеются антитела к вирусу, что говорит о том, что Вы были инфицированы и возможно перенесли инфекцию в скрытой (бессимптомной) форме. Несмотря на это, просим Вас соблюдать общие правила безопасности, надевать маску находясь в общественных местах. | Переболел |
| ИФА / ПЛР | Результат | Интерпретация результата | Статус |
|---|---|---|---|
| ПЦР(полимеразная цепная реакция) | РНК вируса не обнаружено | У вас не обнаружен вирус в верхних дыхательных путях. С высокой вероятностью Вы являетесь носителем вируса. Однако, для полной уверенности, если Вы недавно перенесли COVID-19, Вам лучше сдать повторный анализ через 24-48 часов ПЦР методом. | Не является носителем вируса |
| РНК вирус обнаружено | У вас обнаружен вирус. Это означает, что Вам необходимо находиться в самоизоляции, и через 10-14 дней повторно сдать ПЦР-анализ на коронавирус. При получении двух отрицательных ПЦР-результатов с интервалом 24-48 часов, и после консультации с врачом, Вы уже сможете не считать себя носителем инфекции. | В стадии заболевания |
Исследования в DIAGEN
| Код | Наименование | Материал для анализа | Срок выполнения | Цена |
| 21107 | Коронавирус SARS-CoV-2, качественное определение РНК методом ПЦР | соскоб из ротоглотки и носа | срочно 12 ч 24 ч | 930,00 750,00 |
| 21112 | Определение штаммов коронавируса, методом ПЦР Real-Time (RT) | соскоб из ротоглотки и носа | 24 ч | 1250,00 |
| 30540 | Антиген к COVID-19 | соскоб из ротоглотки и носа | 30 минут | 508,00 |
| 31177 | Антитела IgG, методом иммуноферментного анализа (ИФА-тест) | сыворотка крови | срочно 24 ч 48 ч | 410,00 315,00 |
| 30537 | Антитела IgM, методом иммуноферментного анализа (ИФА-тест) | сыворотка крови | срочно 24 ч 48 ч | 410,00 315,00 |
| 30538 | Антитела IgА, методом иммуноферментного анализа (ИФА-тест) | сыворотка крови | срочно 24 ч 48 ч | 410,00 315,00 |
| 30554 | Антитела IgG к S-белку | сыворотка | срочно 24 ч 48 ч | 533,00 410,00 |
| 30539 | Антитела IgА + IgM + IgG, методом иммуноферментного анализа | сыворотка | срочно 24 ч 48 ч | 1094,60 842,00 |
| 60068 | Check-up при коронавирусной инфекции: ОАК, коагулограмма, С-реактивный белок, Д-димер | сыворотка крови кровь ЭДТА замороженная цитратная плазма | 48 ч | 869,00 |
| 30544 | Лабораторный индикатор (Neutrophil to lymphocyte ratio, NLR) прогнозирование течения COVID-19 | кровь ЭДТА | срочно 90 мин 24 ч | 280,00 140,00 |
| 21111 | Определение вирусной нагрузки вируса SARS-CoV-2, методом ПЦР | соскоб из ротоглотки и носа | срочно 12 ч 24 ч | 1023,00 825,00 |
| 60067 | Коронавирус SARS-CoV-2: РНК методом ПЦР + IgM | мазок из носа и ротоглотки + сыворотка | срочно 24 ч 48 ч | 1 651,00 1 270,00 |
| 21109 | Коронавирус SARS-CoV-2 + ОРВИ, качественное определение методом ПЦР | мазок из носа и ротоглотки | срочно 24 ч 48 ч | 1 650,00 1 269,00 |
| 21110 | Коронавирус SARS-CoV-2 + ОРВИ + Вирусы гриппа А / В, качественное определение методом ПЦР | мазок из носа и ротоглотки | срочно 24 ч 48 ч | 2 598,00 1 998,00 |
*Результат анализа выдается на английском, украинском, русском языках по Вашему запросу, без дополнительной оплаты.
Исследование сдается в порядке живой очереди в течение всего дня.
Для сдачи исследований на коронавирус (ПЦР, антитела, антиген) необходимо предоставить документы подтверждающие личность. Для выдачи результата на английском языке необходима копия или фото загранпаспорта.
Дополнительная услуга — выезд медицинской сестры на дом (по предварительной записи)
| Код | Наименование | Цена |
| 0003 | Вызов медицинской сестры на дом (в пределах Киева) | 300 грн |
| 0004 | Вызов медицинской сестры на дом (в пределах 5 км от Киева) | 350 грн |
| 0005 | Вызов медицинской сестры на дом (в пределах 30 км от Киева) | 400 грн |
*Если средний чек на анализы выше 3 000 грн, выезд медицинской сестры бесплатный в пределах Киева.
Выезд медсестры формируется заранее, за один-два дня: +38 066 872 77 87.
На сегодняшний день не осталось людей, неосведомленных о COVID-19. Весь мир убедился в высокой скорости его распространения и опасности осложнений. Теперь актуальным стал вопрос раннего выявления заболевания для ограничения контактов.
Тест на коронавирус позволяет определить, попал ли возбудитель в кровь пациента. Мы разберем, какими методами он проводится, можно ли пройти его самостоятельно, как интерпретировать результат.
Что такое ПЦР-тест?
ПЦР-тест — это основной метод исследования биологических жидкостей на коронавирус. Он давно используется для выявления всевозможных инфекций в организме человека. ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция.
Тест основан на лабораторном изучении фрагмента ДНК во взятом материале. Фрагмент многократно удваивают и наблюдают, повторяется ли в нем искомый участок. Эксперимент показывает, есть ли коронавирус в организме человека. При этом определить его наличие можно даже до появления первых симптомов. Инкубационный период составляет до шести дней. За это время инфекция может поразить большое количество людей. Если вовремя сделать ПЦР-тест, пациент будет изолирован. Это предотвратит распространение вируса.
Кому и как проводят ПЦР-тест на ковид?
Подобные исследования проводят повсеместно с целью сдерживания опасной инфекции. В большинстве случаев это происходит добровольно, но иногда обязанность обусловлена требованиями закона.
Сдать ПЦР-тесты должны все путешественники, прибывающие в Россию. Причем условия одинаковы не для всех. Для иностранцев отрицательный результат теста — фактически пропуск в страну. Соотечественники же могут посетить лабораторию позднее.
Сделать это должен:
- любой человек с признаками ОРВИ;
- член семьи пациента, у которого диагностирована коронавирусная инфекция;
- потенциальный контактный гражданин, который находился в общественных местах без маски или общался с больным;
- медработник, лечивший зараженного.
ПЦР-тест проводится путем забора мазка из носоглотки. Сделать его можно в лаборатории или вызвав врача на дом. Реакцию запускают в лабораторных условиях.
Результат теста: как интерпретировать?
Для полимеразной цепной реакции требуются сутки. Однако с учетом загруженности лабораторий сроки ожидания могут увеличиться до двух-трех дней. Результат трактуется однозначно. Наличие ДНК COVID-19 означает заражение. Отрицательный тест на вирус позволяет допустить его отсутствие в организме.
Почему только допустить? Результат исследования может быть неточным. При получении ложноотрицательного есть вероятность, что:
- забор материала осуществлялся с нарушениями;
- анализ был взят на поздней стадии заболевания;
- вирус не попадал в носоглотку или быстро спустился по дыхательным путям;
- человек продезинфицировал полость рта антисептиком перед забором материала.
Вероятность ложноположительного результата невелика. Такое возможно, если тестирование проводилось в антисанитарных условиях (вирус попал в биоматериал после забора).
Достоверно ли экспресс-тестирование?
Различают такие виды экспресс-теста: исследование методом иммунохроматографии, использование набора реагентов. В первом случае человеку предлагается сдать кровь в медицинском учреждении. У анализа есть преимущества:
- низкая цена по сравнению с ПЦР;
- высокая скорость (до получаса);
- простота реализации.
Однако точность его вызывает сомнения. Экспресс-анализ показывает только присутствие компонентов вируса, а не его самого. Поэтому все положительные пробы важно перепроверять методом ПЦР.
С экспресс-наборами (например, Standard Q Covid-19) человек работает сам. Это не аналог иммунохроматографии: кровь здесь не понадобится, достаточно мазка из носоглотки. Что именно нужно делать — написано в инструкции.
При контакте биоматериала с реагентом происходит реакция с окрашиванием (как с тестом на беременность). Такое исследование на коронавирус достаточно быстрое (до 20 минут), однако не слишком точно.
Тест на антитела
Антитела к коронавирусу, выявленные в организме, показывают его реакцию на возбудитель. Если он вырабатывает специфические иммуноглобулины, это может означать, что:
- человек переболел COVID-19 (в том числе бессимптомно);
- антитела способны бороться с вирусом в случае его повторного проникновения в кровь;
- человек может быть донором и спасать других зараженных, кто переносит заболевание тяжелее.
Если тестирование показало, что антитела к коронавирусу присутствуют, это еще не значит, что их носитель больше никогда не заболеет.
Хотя статистика имеется небольшая, вирусологи пришли к выводу, что положительный тест на антитела может ненадолго приравниваться к вакцинации. Однако это справедливо в течение полугода после выявления инфекции. По истечении этого срока вновь появляются риски, и пациенту рекомендована прививка.
Как расшифровать анализ на антитела?
Обследуемый на антитела может иметь в организме несколько видов белков, вырабатываемых иммунной системой:
- IgM — реакция на любую острую инфекцию. Обычно присутствуют в организме в течение месяца после заражения, однако при COVID-19 этот срок увеличивается до 3 месяцев. Могут сохраняться даже в отсутствие вируса.
- IgA — реакция непосредственно на COVID-19. Их количество должно снижаться по мере выздоровления.
- IgG — запоминающая реакция организма на перенесенную инфекцию. Синтезируются через 6 недель после заражения и формируют иммунитет.
Если в анализе на антитела есть IgA, значит, человек столкнулся с коронавирусом. Если их сопровождают IgG, то больной выздоравливает, если нет — инфекционное заболевание протекает в данный момент. Об устойчивости иммунной системы к вирусу говорит показатель IgG более 1,1.
Возможен ли экспресс-анализ?
Пройти диагностику на антитела можно и в домашних условиях. Например, Leccurate SARS-CoV2 Antibody Test позволяет самостоятельно провести хроматографический иммуноанализ крови. Брать ее можно как из пальца, так и из вены, хотя второй способ без медсестры реализовать сложно. Проходить экспресс-диагностику на антитела лучше натощак. В набор входит одноразовый ланцет для прокола кожи.
Кровь помещается в лунку тестового устройства, где смешивается с буферной жидкостью. Индикаторная реакция происходит в течение 10-20 минут. В зависимости от окрашивания определенных зон, можно обнаружить наличие IgM, IgG или их отсутствие.
Какой метод диагностики лучше?
Формулировать вопрос таким образом не совсем корректно. Речь идет о двух методах с разными задачами. Тест на коронавирус, проводимый через полимеразную цепную реакцию, позволяет определить, болеет обследуемый или нет. Сравнивать его можно только с анализом крови и экспресс-наборами. Картина по итогам полноценного теста более достоверна.
Обследование на антитела параллельно может подсказать, нет ли инфекции в организме на данный момент. Однако в первые дни такой метод неэффективен. Иммунный ответ формируется не сразу, поэтому ошибочный вывод об отсутствии вируса не связан с несовершенством анализа. На это требуется до 14 дней, потом по наличию IgA можно судить о состоянии больного.
Самая главная рекомендация — не стоит намеренно заражаться COVID-19 с целью формирования антител. Коронавирусная инфекция малоизученна — нельзя предсказать, как она будет протекать в конкретном случае. К тому же, антитела формируются не навсегда и вакцинацию не заменяют.
Во избежание случайного заражения важно:
- носить средства индивидуальной защиты в общественных местах;
- пользоваться санитайзером;
- избегать контактов с зараженными;
- укреплять иммунитет;
- обращаться к врачу при первых признаках респираторного заболевания.
Эффективным методом профилактики вирусных заболеваний является вакцинация. Она в России добровольная — обязать делать прививку не может никто. Идти на такой шаг стоит после изучения возможных рисков, определения противопоказаний и сопоставления с ожидаемыми последствиями инфицирования.
Врачи и фармакологи постоянно объясняют, почему нельзя прививаться детям, беременным, аллергикам, людям с тяжелыми реакциями на другие вакцины в анамнезе. При наличии иных ограничений нужна консультация специалиста.
16.12.2020
Экспресс-тест на выявление антигена SARS-CoV-2 – быстрый способ диагностики COVID-19 на ранних стадиях заболевания методом иммунохроматографического анализа.
О тестировании
Иммунохроматографический анализ (ИХА) – качественный анализ, основанный на реакции между антигеном (вещество, определяемое организмом как чужеродное) и соответствующим ему антителом в биологическом материале человека.
Другими словами, исследование методом ИХА выявляет белки вируса, распознаваемые иммунной системой человека.
Чувствительность теста: 84.38%
Для чего проводится?
Экспресс-тест на выявление антигена SARS-CoV-2 является вспомогательным методом ранней диагностики SARS-CoV-2 у пациентов с клиническими симптомами ОРВИ.
Обратите внимание!
Результаты экспресс-теста на выявление антигена SARS-CoV-2 не будут приняты для выписки/закрытия больничного, по возвращении из-за границы. Уточните заранее в организации, куда вы планируете предоставлять результат, подходит ли он или требуется результат ПЦР-диагностики.
Чем отличается от ПЦР-диагностики?
Как и ПЦР, экспресс-тест на антиген позволяет определить наличие в организме новой коронавирусной инфекции на ранних стадиях заболевания, только гораздо быстрее – всего за 15-30 минут.
Преимущества:
- Готовность результата экспресс-теста – в течение 30 минут.
- Врач прямо на приеме может провести тестирование и в течение того же приема получить результат и сделать корректные назначения.
Необходимый биоматериал
Мазок из носоглотки и ротоглотки.
Подготовка к анализу
До взятия мазков запрещается:
- За 3 часа орошение ротовой полости лекарствами, рассасывание таблеток, полоскание рта, чистка зубов;
- За 2 часа есть, пить;
- За 1 час курить.
Как проводится тестирование?
Забор биоматериала проводится двумя стерильными зондами. Мазки берутся со слизистой нижнего носового хода и из ротоглотки. Взятый биоматериал помещается в раствор на несколько минут, после чего 3 капли выделенного образца наносятся на специальную тестовую кассету. Результат оценивается в течение 15-30 минут.
Где проводится:
Результат анализа
Выявляет инфицирование или отсутствие инфицирования непосредственно на момент проведения тестирования:
- Отрицательный - инфекции не выявлено;
- Положительный - инфекция обнаружена.
Стоимость
Экспресс-тест на выявление антигена SARS-CoV-2 в клинике
Экспресс-тест на выявление антигена SARS-CoV-2 на дому
*Цена включает стоимость исследования и забора мазков в амбулатории.
**Цена включает стоимость исследования и забора мазков на дому. Стоимость выезда рассчитывается в зависимости от адреса, дня недели (будний/выходной) и времени (утро/день/вечер) выезда. Окончательную стоимость услуги по вашей заявке уточняйте при записи.
— Первый вопрос: а как вообще выглядит тест на коронавирус? Экспресс-тест на ВИЧ мы все видели: белая лопаточка с ручкой и пробирка с реагентом. Через 15 минут готов результат. Новый коронавирус тестируется по методу полимеразной цепной реакции (ПЦР). Насколько вообще его сложно производить?
— Выглядит тест на коронавирус как пробирки с прозрачными жидкостями в коробочке или пакетике, как-то так. Но чтобы провести саму реакцию и получить результат, нужно еще специальное оборудование.
Комплект для ОТ-ПЦР в реальном времени производства компании BGI Group
Производить тест умеренно сложно, это высокие технологии, но очень хорошо отлаженные за много лет. Ограничения — как на любом производстве: реагенты и материалы, производственные мощности и должная культура производства — не надо объяснять, что будет, если чихнуть в пробирку, — плюс кадры. Каких объемов реально достигнуть — зависит от того, какие мощности будут задействованы: если, например, какие-то линии, которые сейчас производят ПЦР-тесты для других инфекционных заболеваний, волевым решением перебросить на SARS-CoV-2, производство возрастет.
— Почему сейчас тестируют коронавирус именно по методу ПЦР, а не иммуноферментного анализа, например, как ВИЧ? С ИФА диагностика была бы быстрее, дешевле? Или это вообще не имеет значения?
За подробностями лучше обратиться к специалистам в области молекулярной диагностики. Но, на мой взгляд, ПЦР с обратной транскрипцией, а именно он используется в случае с COVID-19, — хороший метод. Для ПЦР-тестов характерна высокая чувствительность. В их основе лежит амплификация нуклеиновой кислоты, то есть даже при малом количестве копий в образце можно получить хороший сигнал. Кроме того, для разработки таких тестов нужен, по большому счету, только геном вируса или часть генома.
— По факту ПЦР-тесты для COVID-19 появились почти сразу после того, как китайцы опубликовали расшифровку генома вируса. То есть для того, чтобы начать их разработку, не нужно было никаких образцов, хватило журнальной публикации и специалистов, способных быстро разработать технологию.
— Да. В том и прелесть ПЦР-теста, что для него достаточно генома вируса. Зимой, как только первый геном был опубликован, специалисты во всех странах начали заказывать синтез генетического материала nCoV-19. Зная нуклеотидную последовательность генома, в лаборатории можно получить участок этого генома и дальше экспериментировать уже с ним. В частности, проверить чувствительность и специфичность теста, используя вместо клинических образцов растворы ДНК.
В январе у ученых большинства стран вообще и не было другого выхода, настоящие пациенты имелись только в Китае. К такому методу могут быть претензии. Например, если чувствительность теста проверяется по растворам кДНК, не учитываются потери при обратной транскрипции. Тут разные другие тонкости. Но в целом ученые сработали очень оперативно.
КАК УСТРОЕН МЕТОД ПЦР?
ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это метод тестирования, который способен находить генетический материал вируса непосредственно в крови пациента, слюне или любой другой жидкости, изобретенный в 1983 году американским биохимиком Кэрри Муллисом.
Как это работает?
Сначала вирусную ДНК выделяют из материала, представленного в лабораторию, денатурируют: на этом этапе двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96 °C, чтобы цепи ДНК разошлись. Затем добавляют так называемые праймеры — начальные звенья цепочки, которые необходимы для старта синтеза новой копии, и так называемую полимеразу — тот самый фермент, который и будет заниматься репликацией ДНК.
Схема: как ДНК-полимераза копирует каждую из цепочек ДНК по отдельности. РНК-праймер изображен белым прямоугольником в начале каждой из двух цепей
Как правило, для лабораторной ПЦР используются ДНК-полимеразы из термофильных бактерий, поскольку в течение реакции смесь многократно охлаждают и нагревают. На следующем этапе в смесь из ДНК, полимеразы и праймеров добавляются нуклеотиды — то есть строительный материал для воспроизводства, после чего емкость с нею нагревается до 37°C, и процесс запускается.
На последующей стадии элонгации полимераза начинает синтез на каждой из двух цепочек разделенной ДНК недостающей пары. Происходит это по принципу комплементарности: фермент присоединяет напротив каждого нуклеотида, из которых состоят ДНК, противоположный. По завершении реакции цикл неоднократно повторяется (см. видео ниже).
Общая схема полимераной цепной реакции. Цифрами обозначены ее этапы.
Ингибиторы обратной транскриптазы — одни из самых распространенных видов лекарств от ВИЧ-инфекции. К ним относятся, например, зидовудин и ламивудин — самые первые препараты АРВТ, разработанные еще в 80-х.
Производится ПЦР на специальных приборах, амплификаторах, или так называемых термоциклерах (Thermal cycler).
Наглядно, как работает метод ПЦР, можно посмотреть на приведенном ниже видео.
— Что касается ИФА-тестов для коронавируса, их разработать так и не успели?
— Почему? Тесты на определение антител к антигенам SARS-CoV-2 в крови существуют. У теста на антитела свои преимущества. Но я бы сказала так: они с ПЦР-тестом дополняют друг друга. Тест на антитела лучше работает на поздних стадиях. Антитела в крови сохраняются и тогда, когда вирус исчезает из организма, то есть с помощью такого теста можно узнать, кто переболел COVID-19 в прошлом.
— Даже если у пациента не было выраженных симптомов и дело обошлось без госпитализации?
— А что за организации, кто в нашей стране занимается этими тестами? Роспотребнадзор?
У каждого теста есть погрешность. При низкой заболеваемости ложноположительных результатов может быть намного больше, чем выявленных реальных пациентов, даже если тест вполне хороший.
На первом заседании координационного совета по борьбе с коронавирусом вице-премьер РФ Татьяна Голикова сказала, что правительство ждет от регионов предложений о том, на базе каких еще лабораторий можно будет проводить эти исследования. Частные компании тоже смогут делать тесты на коронавирус на платной основе. Возможно, в самом скором времени будет новая информация о том, как все это будет происходить.
— На 15 марта появилась информация, что в России было произведено почти 110 тысяч тестов на коронавирус. Это много для наших масштабов или мало?
— По поводу возможности произвести достаточное количество тестов — тут много вопросов: производственные мощности, которыми мы располагаем, количество реагентов, которые понадобятся, наконец, лаборатории с необходимой техникой и обученным персоналом, где эти тесты проводить. Мало нам будет пользы и от миллиона тестов, если не хватит рук, чтобы эти тесты запускать. Все эти вопросы надо исследовать.
Тест ПЦР на коронавирус американского производства, фото: US Centers for Disease Control and Prevention
Читайте также: