Как сделать споровый отпечаток
Обновлено: 07.07.2024
Шапки перезревших грибов укладывают на лист белой бумаги споровым слоем вниз в сухом месте. Через несколько дней постукивают сверху по шапочкам, аккуратно их снимают, а споры высыпают в бутылку с теплой водой (примерно 40 градусов) . Взбалтывают и разливают в нужном месте. Если это опята - на пне делают спил, насекают топором место среза не пне, выливают туда воду со спорами и прикрывают спиленным кружочком, закрепив его гвоздем.
Вопрос конечно интересный: ) Первый раз сталкиваюсь с таким определением "споровые отпечатки грибов".
Грибы отлично растут и размножаются сами - только надо создать им благоприятную среду/условия. Если уточните, что за гриб можно будет сказать что то конкретное:)
Форма и орнаментация спор.
Если цвет спор гриба не очевиден (его часто, но далеко не всегда можно определить по цвету зрелых пластинок), необходимо приготовить споровый отпечаток. Для этого отделите шляпку гриба от ножки и положите ее пластинками или трубочками вниз на стеклянную пластинку, накройте чем-нибудь, например стаканом, чтобы предотвратить высыхание, и оставьте примерно на полчаса или на час.
За это время высыплется достаточное количество спор, и их цвет легко можно будет определить, положив стекло на лист белой бумаги (предварительно следует аккуратно убрать шляпку и дать отпечатку просохнуть в течение нескольких минут).
Затем при помощи микроскопа можно определить форму спор и их размеры.
Споры, взятые не из отпечатка, а с поверхности пластинок, могут оказаться незрелыми, и для определения размера необходимо будет произвести порядка двадцати измерений.
1. Не нужно постоянно лазить в гроубокс и смотреть, как там поживают будущие грибочки, можно заглядывать раз в 2-3 дня не чаще. Это сложно, особенно в первый гров, но нужно быть терпеливыми.
2. Стерильность это наше-ваше все, причем на всех этапах, даже когда уже собрано несколько волн грибов и мицелий представляет собой монолитный кусок.
3. Субстраты очень капризны в плане увлажнения, поэтому ошибки с пересушиванием или переувлажнением это нормально. На случай переувлажнения на дно кладем вермикулит, в случае пересыхания добавляем стерильной водички с гентамицином или перекисью водорода - 3% шприцем
Общий порядок действий (кратко)
1. Делаем заранее споровую взвесь в шприце, из расчета половины принта диаметром 3-4 см. на 10 куб воды. Выдерживаем 1-2 дня в темном теплом месте для активации спор.
2. Замачиваем субстрат (овес не шелушенный, пшеницу или др.) в холодной воде на 12-24 часа.
3. Варим субстрат в течение 20-40 минут (пшеницу варим до момента, когда разваренных зерен будет 3-5% от всех).
4. При варке добавляем пол таблетки Левомицетина на 0.5 кг сухого субстрата. Если добавить больше, то мицелий будет расти угнетенно, меньше, толку не будет.
5. Даем хорошо стечь на большом дуршлаге, выкладываем на полотенце или ткань для сушки на 10-20 минут.
6. Рассыпаем субстрат по банкам. На дно банок насыпаем 1-1.5 см вермикулита. Закрываем крышками с фильтрами. Закрываем крышки фольгой, чтобы не попадала вода при стерилизации.
7. Стерилизуем банки в скороварке 1 час или 1-30 в обычной кастрюле. Даем остыть естественным путем, через 12-24 часа повторяем процедуру.
8. За час до инокуляции банок спорами добавляем в шприц 1 куб Гентамицина на 10 куб споровой взвеси.
9. Заражаем (инокулируем) банки спорами и отправляем их на обрастание в гроубокс.
10. Через, как правило, 12-14 дней, когда банки зарастут мицелием полностью, кейсим их, т.е. переклываем субстрат в контейнеры, покрываем покровным слоем и убираем на 7 дней обратно в гроубокс или в темное теплое место.
11. После этого контейнеры переносим в парник и начинаем стимуляцию плодоношения.
12. Собираем первую волну, сушим.
13. Отправляем кейсы на регидрацию в холодильник на 24 часа.
14. Собираем второю волну.
15. Делаем принты начиная со второй волны.
16. И т.д. пока кейсы будут плодоносить, как правило, удается снять до 8 волн.
Список того, что нужно (из расчета 4-6 циклов выращивания)
Ø Принт со спорами
Ø Ватные диски - 3-4 уп.
Ø Марлевые повязки - 2 шт.
Ø Шприцы ~ 10 шт. по 10 кубов
Ø Перекись водорода - 10 бутылочек
Ø Перчатки резиновые - уп.10 шт
Ø Раствор для инфузий NaCl 0,9% (можно использовать кипяченую воду) для приготовления взвести из спор
Ø Самоклеящиеся послеоперационные повязки с подушечками - 20 шт.
Ø Левометицин – 2 пачки
Ø Гентамицин в ампулах – 2 пачки
Ø Изолента – 1 шт.
Ø Субстрат (оптимально пшеница или овес не шелушенный) 900 гр. для 8 банок
Ø Вермикулит – 4 пакета
Ø Ящик для вещей не прозрачный объемом 60-90 литров для изготовления гроубокса
Ø Ящик для вещей, для изготовления парника. Можно тоже не прозрачный для конспирации ;э)
Ø Обогреватель аквариумный с терморегулятором 50-100 Вт. (например: Aquael 50 Вт.)
Ø Сетка металлическая для изготовления полки-второго дна для гроубокса и полки для парника – 1м*1м
Ø Лампа диодная – 5-10 Вт. с цветовой температурой от 5000 до 7000 Кельвинов
Ø Герметик – 1 шт.
Ø Оргстекло для люка лампы – 1 шт.
Ø Уплотнитель дверной\оконный для уплотнения крышки парника – 2-3 м.
Ø Компрессор аквариумный 60-90 литров\ч
Ø Керамзит на дно парника - 1 большой мешок
Ø Автоматические розетки для автоматизации освещения и вентиляции (например, как в Ikea см. фото в разделе про парник)
Ø Земля для кактусов - 2 кг.
Ø Пищевые лотки объемом 1.4-2 литра – 6-8 шт.
Ø Пищевая толстая фольга для оборачивания лотков и банок – 1 рулон.
Приготовление взвеси из спор
Понадобиться:
1. Марлевая повязка
3. Перекись водорода\спирт
5. Отпечаток спор
8. Раствор для инфузий NaCl 0,9% или обычная кипяченная вода
Перед операцией закрываем все окна и двери, сильно пропшикиваем помещение пульверизатором у потолка и делаем все в перчатках и в марлевой повязке.
Все операции проводим над огнем! Лучший вариант над раскаленной плитой, между приоткрытой включенной духовкой и задними конфорками, т.е. на поверхности ближних конфорок.
Одеваем маску и перчатки. Смачиваем ватный диск перекисью, протираем рабочую поверхность и перчатки. Зажигаем свечу. Готовим ванночку-крышечку, заливаем в нее перекись, в ней будем охлаждать иглу и нож. Протираем нож и прокаливаем кончик. Протираем резиновую пробку бутылки с раствором и накрываем тампоном. Достаем поршень из шприца. Соскабливаем споры с принта в шприц со стороны задней части из расчета половины принта диаметром 3-4 см. на 10 куб воды. Вставляем поршень и прокаливаем иглу над огнем. Остужаем в ванночке иглу, затем набираем из бутылки раствор в шприц, оставляем место для кубика гентамицина.
Спо́ровый порошо́к (спо́ровый отпеча́ток) — порошок спор гриба, получаемый из плодового тела для исследования и определения родовой принадлежности гриба.
Цвет спор часто отличается от цвета гименофора, поэтому является важным определительным признаком.
Содержание
Получение спорового отпечатка
Для получения спорового отпечатка срезанную шляпку помещают на лист белой или чёрной бумаги (в зависимости от предполагаемого цвета спор), гименофор не должен касаться поверхности бумаги. Для этого оставляют небольшую часть ножки или закрепляют шляпку булавкой. Кожицу рекомендуется смочить несколькими каплями воды, затем гриб накрывают чашкой и оставляют на несколько часов (до суток).
Споры дождевиков можно получить просто вытряхнув их из зрелого плодового тела.
Цвет спор следует рассматривать при естественном освещении.
Исследование спорового порошка
По цвету спорового отпечатка иногда можно отличить ядовитый гриб от сходных с ним съедобных, например:
- Ядовитый Chlorophyllum molybdites легко отличить от съедобных грибов-зонтиков (Macrolepiota) по зелёным спорам (у зонтиков — белые или слабоокрашенные).
Исследование на амилоидность
Исследование спорового порошка на амилоидность может использоваться для определения родовой, а иногда и видовой принадлежности гриба.
Читайте также: