Как сделать родамин
Добавил пользователь Алексей Ф. Обновлено: 04.10.2024
Для окраски препаратов флюорохромными красителями необходимы:
- раковина или специальный вместительный лоток для
проведения окраски;
- пинцет или щипцы для взятия предметных стекол с мазками;
- газовая или спиртовая горелка для фиксации препарата, если он
не фиксирован ранее в сушильном шкафу;
- металлический стержень для приготовления ватного тампона,
используемого вместо горелки для фиксации препарата перед
окраской , если он не фиксирован ранее в сушильном шкафу;
- раствор флюоресцентных красителей;
- раствор для обесцвечивания мазков;
- раствор для гашения фона обесцвеченного мазка;
- емкость с дистиллированной водой для промывания мазков;
- штатив для просушивания окрашенных стекол на воздухе в
вертикальном или наклонном положении.
При окраске флюорохромными красителями ни в коем случае нельзя подогревать мазки и пользоваться фильтровальной бумагой.
Промывание мазков в процессе окраски следует производить только дистиллированной водой, так как водопроводная вода содержит соединения хлора, которые могут изменять флюоресценцию.
Микроскопию производят по возможности сразу же после окончания процедуры окраски люминесцентными красителями и высыхания мазков. В случае невозможности проведения немедленной микроскопии окрашенные мазки рекомендуется сохранять, прикрыв черной бумагой во избежание ослабления флюоресценции.
При окраске мазков необходимо:
- избегать неполного обесцвечивания, т.к. кислотоустойчивые
микобактерии практически не обесцвечиваются;
- не делать толстых мазков, так как это затрудняет
обесцвечивание и фиксацию мазка на стекле.
Мазки, которые использовались для флуоресцентной микроскопии, в случае сомнений в истинности феномена кислотоустойчивости можно повторно окрасить по методу Ziehl-Neelsen.
В нашей стране наибольшее распространение получили следующие методы окраски микобактерий люминесцентными красителями:
10.4.1. Метод окраски аурамином ОО и родамином С
Реактивы:
- спирт этиловый 96° марки ОП-2, ТУ 6-09-4512-77;
- метиленовый синий хлорид, ТУ 6-09-945-75;
- аурамин 00, (аурамин О - Sigma);
- родамин С, ТУ-6 -09-2463-77 (родамин В - Sigma);
- вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.
Приготовление растворов:
| 1,0 г 0,1 г 1000 мл |
Раствор 1. Раствор аурамина - родамина:
Каждый краситель растворяют отдельно в 150 — 200 мл дистиллированной воды и помещают в термостат при 37°С на 18 — 24 часа. Затем растворы сливают в одну емкость и доводят общий объем до 1000 мл. Приготовленный раствор красителей хранят в емкости из темного стекла в прохладном, защищенном от света месте.
Аурамин обладает канцерогенной активностью, поэтому не следует допускать попадания на кожу его порошка или раствора.
Раствор 2. Обесцвечивающий раствор:
Концентрированная соляная кислота 3 мл
Этиловый спирт 96° 97 мл
Аккуратно добавить 3 мл концентрированной соляной кислоты к 97 мл этилового спирта.
Предупреждение: осторожно вливайте кислоту в спирт, но не наоборот.
Раствор 3. Гаситель фона:
Метиленовый синий хлорид 25 мг
Вода дистиллированная 100 мл
В 100 мл дистиллированной воды растворить 25 мг метиленового синего хлорида.
Растворы родамина В в глицерине, а также родамина QG в спиртах ( рис. 154 и 39) и в воде являются примером растворов, у которых абсолютная величина поглощения мало зависит от температуры. У многих красителей при повышении температуры абсолютная величина поглощения сильно падает. На рис. 155 изображается исследованное автором [304] изменение поглощательной способности родамина G экстра в изоамиловом спирте при повышении температуры от 18 до 95 С. На этом интервале температур поглощатель-ная способность уменьшается в 6 раз. Следует подчеркнуть, что все температурные изменения поглощательной способности вполне обратимы и в точности следуют за прямым и обратным изменением температуры. [2]
К раствору родамина В ( 0 05 г родамина В в 500 мл воды) в пробирке на 5 мл прибавляют каплю солянокислого раствора хлорида висмута. [3]
Возбудить люминесценцию раствора родамина 6Ж в глицерине линейно поляризованным светом, электрический вектор которого ориентирован вертикально. [4]
К 5 мл раствора родамина С добавляют 4 мл раствора метилового фиолетового. [5]
Вводят 0 40 мл раствора родамина Б и 0 1 мл раствора солянокислого гидроксиламина и смешивают. Добавляют 10 0 ( или 5 0) мл бензола и встряхивают в течение 1 мин. Выдерживают в течение нескольких минут, сливают водную фазу и небольшое количество бензольного слоя. Фильтруют бензольный экстракт через маленькую воронку с небольшим тампоном стеклянной ваты для удаления капелек воды и отбрасывают первую порцию фильтрата. [7]
Затем прибавляют 5 мл раствора родамина В и 10 мл ( точно отмеривая) изопро-пилового эфира, сильно взбалтывают 100 раз, дают слоям разделиться и измеряют оптическую плотность слоя органического растворителя при Х565 ммк. [8]
Затем прибавляют 5 мл раствора родамина В и 10 мл ( точно отмеривая) изопропилового эфира, сильно взбалтывают 100 раз, дают слоям разделиться и измеряют оптическую плотность слоя органического растворителя при А, 565 ммк. [9]
Для этого силикагель обрабатывают раствором родамина 6 - Ж в метиловом спирте и затем высушивают при 100 С. Силикагель, окрашенный родамином, в ультрафиолетовом свете люминесцирует ярко-желтым светом, а в местах расположения зон бензоатов образуются темные полосы. [10]
При добавлении 1 % - ного раствора родамина Б ( тетраэтил-родамина) [58] в 3 N соляной кислоте к солянокислому раствору золота ( III) образуется пурпурно-красный осадок. [11]
В пробирки вносят по 2 мл раствора родамина 6ж, прибавляют 0; 2 0; 2 5; 3 0; 3 5; 4 0; 4 5; 5 0 мл рабочего стандартного раствора изофталевой кислоты. [12]
В качестве контроля служит 2 мл раствора родамина В, подкисленного 0 1 % - ной соляной кислотой. Наблюдение ведут в отраженном свете. [13]
В пробирки вносят по 2 мл раствора родамина 6ж, прибавляют 0; 2 0; 2 5; 3 0; 3 5; 4 0; 4 5; 5 0 мл рабочего стандартного раствора изофталевой кислоты. [14]
Сразу же после этого добавляют 1 мл раствора родамина Б и перемешивают. [15]
Люминофор — особое вещество, способность которого в преобразовании поглощаемой энергии в обычный свет.
Другими словами, люминофор способен излучать свет под действием ультрафиолета, электромагнитного поля или другого типа излучения.
Так, применяемые в неоновых трубках люминофоры, горят под действием ультрафиолетовых лучей, а также излучения ртутных паров.
Сегодня можно выделить несколько видов люминофоров.
По химическим свойствам их можно поделить на два вида.
Неорганические (кристаллофосфоры).
Такой вид люминофоров нашел применение в люминесцентных лапах, ЭЛТ (электрических лучевых трубках), экранах для рентгена и так далее.
Кроме этого, неорганический люминофор является индикатором радиации.
Используются в производстве флуоресцентных красок, люминесцирующих материалов и так далее.
Часто их применяют для проведения люминесцентного анализа в различных отраслях, к примеру, в медицине, биологии, химии, криминалистике, автомобилестроении и так далее.
Делим люминофоры по характеристикам
По своим характеристикам люминофоры бывают:
фотолюминфоры;
катодолюминофоры;
рентгенолюминофоры;
электролюминофоры;
радиолюминофоры.
Наибольшей популярностью пользуется фотолюминофор — вид люминофора, который обладает определенными свойствами и может длительно сохранять энергию.
После ее накопления люминофор может длительно отдавать ее в форме излучения — ультрафиолетового, инфракрасного или того, который виден глазу человека.
Именно люминофор типа фотолюминофор можно сделать своими руками.
Люминофор активно применяется в самых различных сферах — в полиграфических и текстильных изделиях, в декорациях и шоу-технике, для создания спасительных устройств, для наружной рекламы, при изготовлении спецодежды и так далее.
Широкое применение люминофор получил и в аэрографии — художественной росписи автомобиля.
Люминофор можно наносить на кузов автомобиля или колпаки. Достаточно небольшого слоя, чтобы в темное время суток автомобиль преображался и излучал яркий свет в местах обработки.
Почти во всех перечисленных случаях применяется фотолюминофор — наиболее безопасный, простой в применении и красивый вид люминофора.
Стандартный люминофор состоит из двух основных компонентов — борной кислоты и концентрата хвои.
Обе составляющие найти несложно. К примеру, хвойный концентрат продается во многих аптеках. При этом будьте внимательны. Нужен не экстракт, а именно концентрат. Для приготовления люминофора это очень важно.
Процесс приготовления и меры безопасности
Теперь рассмотрим, как приготовить люминофор самостоятельно. Действуйте в приведенной ниже последовательности.
1. Насыпайте (наливайте) концентрат хвои в заранее подготовленную посуду.
2.Добавляйте небольшое количество воды. Итог таких манипуляций — получение раствора тартразина.
Сам тартразин представляет собой синтетический краситель, имеющий желтый цвет. Данный элемент относится к категории пищевых добавок (известен под названием Е 102/запрещен в ряде европейских стран).
Как правило, тартразин добавляется в йогурты, пюре, мороженое, супы и прочую еду. Минус таких красителей — опасность для астматиков. Чрезмерное попадание Е 102 в организм может привести к зуду, нарушению зрения, мигрени и так далее.
3. Сыпьте немного борной кислоты в ложку.
4. Смачивайте полученную смесь с помощью тартразина.
5. Перемешивайте состав до тех пор, пока не получится однородная масса.
6. Грейте смесь до момента, пока она не превратиться в густой состав зеленоватого оттенка. Чтобы лучше прогреть смесь, возникшие сверху пузырьки необходимо проткнуть.
7. После этого охлаждайте смесь и вливайте небольшое количество тартразина. После этого снова прогревайте состав.
В итоге вы должны получить желтое однородное вещество.
Вот и все. Впоследствии готовый люминофор можно перетереть в порошок, добавить в жидкость (как правило, обычную воду).
Кроме этого, люминофор можно изготовить, смешав родамин и борную кислоту (в последнем случае качество продукта будет много хуже).
При выполнении работ будьте осторожны, работайте в перчатках и по возможности защитите глаза с помощью очков.
Дети воруют конфеты? Жена берет тайком твой крем для омоложения кожи на локтях? Их можно поймать с помощью светящегося порошка, как это делают спецслужбы.
Ну а добыть этот чудо-порошок нам поможет химик Дмитрий Гришанов из Института общей и неорганической химии им. Н.С. Курнакова.
Есть еще флуоресцеин, он продается в аптеках и светится в ультрафиолете зеленым. Но тоже отмывается неважно.
Самый безобидный покупной люминофор — обычный тоник с натуральным хинином. Если смочить им любую поверхность, то даже после высыхания хинин будет светиться синим в УФ-лучах. И останется на пальцах, если кто-то за эту поверхность схватится.
Если же ты намерен потратить на светящийся порошок минимум денег, но при этом у тебя есть свободное время, делай вот что.
Купи в аптеке борную кислоту в порошке, в супермаркете — лимонную кислоту, тоже в порошке. На все уйдет рублей пятнадцать. Их надо смешать — на 1 грамм борной кислоты 50 мг лимонной.
Добавь пару капель воды и перемешай. Не важно, насколько густой будет смесь, здесь цель — распределить вещества в смеси равномерно.
Выложи смесь на столовую ложку и подогрей ее на огне плиты или зажигалки, как это делают в кино плохие люди с очень плохими веществами. Когда порошок превратится в стеклообразную массу, можно убирать с огня.
Возьми отвертку и сковырни остывшую массу с ложки, потом разотри ее. Получится неприметный белый порошок. Им теперь можно метить что угодно, в свете УФ-лампы он будет светиться зеленым. Когда поймаешь детей на криминале и накажешь за воровство конфет, можно развлечь их эффектом люминесценции: если на порошок посветить в темноте фонариком, он потом еще несколько секунд будет светиться сам.
Читайте также: